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9-6
層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數(shù)不同,從而分離的一種層析法。層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。層析柱樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外,直徑加大,洗脫液體體積增大,樣品稀釋度大。分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高...
8-14
有機(jī)酸分析柱填充有氫形式的陽離子排斥樹脂,特別開發(fā)用于在低牙條件下分離包括酒、果汁、奶制品、生物樣品、工業(yè)原料和環(huán)境樣品中的有機(jī)酸。有機(jī)酸分析柱的洗脫范圍推薦使用濃度范圍在0.002到0.05N的稀硫酸溶液。大多數(shù)的分析使用0.01N的硫酸(pH=±2.3)都可以獲得成功。其他的強(qiáng)酸例如磷酸和高氯酸也可以使用,但是鹵酸例如鹽酸不推薦使用,因為它們會腐蝕不銹鋼。當(dāng)有強(qiáng)酸用于柱子的洗脫液的時候,柱子就進(jìn)行了自身再生。所以,特別的再生步驟是不需要的。但是這樣并不能直接...
8-2
Vision色譜柱在使用過程中,以下幾個小技巧可以幫助我們更好的應(yīng)用Vision色譜柱以獲得預(yù)期的實驗結(jié)果。具體是什么小秘密呢?一起來看下吧。一、Vision色譜柱在線速度相同的情況下,管徑越大需要的流速越大,消耗溶劑越多。F1/D12=F2/D22使用小管徑色譜柱可以節(jié)約溶劑。由公式F=(3πD2u)/20得消耗溶劑只差F1-F2=(D12-D22)3πu/20例如:當(dāng)線速度u=0.1cm/s時,使用管徑D=2.1mm.的色譜柱比使用D=4.6mm的色譜柱,節(jié)約溶劑79%。...
7-17
Vision色譜柱使用越小粒徑的分析效果越好嗎答案是否定的,對于一個裝填的Vision色譜柱而言,隨著裝填粒徑的減小,柱效提高,但是如果附加柱(應(yīng)該指保護(hù)柱,或者冗長的管路系統(tǒng))對色譜系統(tǒng)對譜帶展寬影響足夠明顯。那么,色譜柱的粒徑影響就不容易發(fā)覺。這些附加柱效應(yīng)影響列舉如下:這些附加柱效應(yīng)影響列舉如下:1.進(jìn)樣體積,包括進(jìn)樣環(huán),以及進(jìn)樣閥的額外體積2.管路體積,包括從進(jìn)樣閥(器)出口到色譜柱入口3.保護(hù)柱的間隙和適配器4.在線過濾器體積5.色譜柱入口到色譜填料之間的一段距離的...
7-3
Vision色譜柱在使用過程中,存在一些誤區(qū),本文就介紹下其中一個誤區(qū),即很多人認(rèn)為保護(hù)柱不影響分離效果,這其實是錯誤的。首先,Vision色譜柱配一個保護(hù)柱很好。如果固定相選擇錯誤,保護(hù)柱也能夠?qū)Ψ蛛x有效果。要明確的是:保護(hù)柱是保護(hù)分析柱避免被高殘留的組分污染用的,尤其是那些不想進(jìn)讓它柱子的部分。保護(hù)柱比起分析柱便宜許多,所以污染的保護(hù)柱能夠替換的更加勤。理想的結(jié)果是,Vision色譜柱保護(hù)柱的固定相和分析柱恰好相同。如果固定相保留強(qiáng)(如高載碳量和混合相),就能夠使得保留便...
3-19
凝膠色譜柱是一種常用的分離技術(shù),廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、生物化學(xué)、藥學(xué)、食品科學(xué)等多個領(lǐng)域。它的基本原理是通過凝膠顆粒來實現(xiàn)樣品分離,凝膠顆粒根據(jù)其物理化學(xué)性質(zhì)選擇性地固定不同的化合物,從而實現(xiàn)樣品的分離和純化。常見的凝膠材料包括聚丙烯酰胺凝膠(PolyacrylamideGel,簡稱PA)、瓊脂糖凝膠(AgaroseGel)和硅膠凝膠(SilicaGel)。聚丙烯酰胺凝膠主要應(yīng)用于蛋白質(zhì)、多肽和核酸的分析和純化,瓊脂糖凝膠主要應(yīng)用于大分子多糖、DNA片段的分析和純化,硅膠凝膠主要...
3-2
有機(jī)酸分析柱用于糾正聚合物污染或聚合物床壓縮的可能的操作1.制備新鮮的洗脫液在很多情況下,柱效的喪失會歸結(jié)為洗脫液的污染。所以,要在使用柱子以前要制備新鮮的洗脫液,沖洗所有液體管路。洗脫液在使用以前,應(yīng)當(dāng)用0.2到0.4微米的濾膜過濾。2.聚合物床的“放松”如果使用了不正確的高流速的話,很多聚合物與硅膠連接會缺乏硬度而可以被壓縮或坍塌。然而,它們是可以回彈的,在很多情況下,壓縮是可以恢復(fù)的。要修復(fù)坍塌的聚合物床,關(guān)閉泵,使聚合物放松30分鐘。倒轉(zhuǎn)色譜柱,泵入洗脫液,0.1毫升...
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